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[供应]鼠ELISA试剂盒价格-武汉默沙克生物科技

更新时间:2019-10-9 23:58:06(长期有效)





(2)简易过1碘酸钠法% E0 O+ v: s2 T

本法是以NaIO4先将HRP表面的糖分子氧化成醛基,然后再与Ig上的氨基相结合,所获酶标记抗1体的产率高,将近70%的HRP和Ig结合,99%的Ig与酶结合,酶与Ig的活性无重大损失,是目前最1常用的方法。7 p3 C# @, w9 L5 i% F% @7 r9 Z

1)原理:; h d) X' E' u _& O5 y

经典的过1碘酸钠法中需采用二1硝基氟本封闭HRP上残留的α-和ε氨基基以避免酶分子之间的交联。后来Wilson等改用在低PH下使NaIO4氧化HRP,从而省去了二1硝基氟本封闭HRP步骤。HRP经NaIO4氧化后形成的醛化酶可与抗1体分子的氨基相连,形成斯夫氏硷,后者可进一步用NaBH4(或乙醇1胺)还原生成稳定的酶标记抗1体。


试剂的准备

按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液、洗涤液应用pH计测量。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用,一般室温平衡不低于30min。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。



加样

在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。

加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,鼠ELISA试剂盒价格,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样(一般不建议使用)。有些指标检测(如间接法ELISA)需用稀释的血1清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液,再在其中加入血1清标本,然后在微型震荡器上震荡1min。加酶结合物工作液和底物工作液时可用多道移液器,使加液过程在最1短时间内完成。


做好对照正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血1清、兔血1清或BSA等封闭。实验条件的选择在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯1乙烯、聚本乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚本乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。


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