武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;从图B中发现GaMYB2-GFP的融合表达载体只能在细胞核中能看到绿色荧光,这进一步证明该蛋白不具有跨膜蛋白结构,定位在细胞核中,具有转录因子的一般特征
亚细胞定位
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;从图B中发现GaMYB2-GFP的融合表达载体只能在细胞核中能看到绿色荧光,这进一步证明该蛋白不具有跨膜蛋白结构,定位在细胞核中,具有转录因子的一般特征。可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
采用遗传转化技术获得了整合有拟南芥AtELHYPRP2 (EARLI1-LIKE HYBRID PROLINE-RICH PROTEIN 2, AT4G12500) 基因的转基因株系,研究了该基因编码蛋白对真菌病原体赤霉菌的抗性及其亚细胞定位特征。以拟南芥Col-0生态型基因组DNA为模板,通过聚合酶链反应.主要实验结果如下:浓度为1-7mmol/L的亚可抑制酵母细胞生长,并具有剂量依赖性,其中7mmol/L亚几乎完全抑制了细胞的生长和分裂。..
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;其启动子序列包含TGACG-motif、ABRE、TCA-element、Box-W1、Wbox和BoxS等多个与胁迫相关的顺式作用元件。可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
目的构建通用型植物GFP标签蛋白表达载体,研究蛋白质的细胞内定位对蛋白质组学和代谢组学等研究的意义。方法构建2种GFP标签蛋白质表达载体,分别在GFP的N和C端预留位点,以目的基因。利用该基因载体,分别内切酶Fok I的切割结构域与MS2噬菌体外壳蛋白MCP的串联蛋白(Fok I:MCP:Fok I,FMF)至GFP的N和C端,得到FMF与GFP的融合蛋白GFP:FMF和FMF:GFP,其中FMF的N端带有细胞核定位信号。利用农介导植物瞬时表达侵染本氏和洋葱表皮细胞,观察GFP荧光表达情况。结果成功构建了2种融合了目的基因和GFP的表达载体p ER35GFP-FMF和p ER35FMF-GFP。激光共聚焦结果显示侵染了只含GFP载体的农的细胞,可在细胞核和细胞质中检测到GFP的绿色荧光,而侵染了含核定位信号FMF:GFP和GFP:FMF 2种融合蛋白载体的农的细胞,只在细胞核中观察到绿色荧光。苜蓿不仅营养丰富,其次生代谢产物苜蓿皂甙(alfalfasaponins)近年来被认为是苜蓿的药用功能的主要来源:具有良好的降胆固醇、效果,还有、、、杀虫等药用及生物活性。结论该载体系统可运用于研究蛋白质在植物细胞中的亚细胞定位,具有简单、和通用性的特点。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;序列对比分析表明,在杨树当中,PtWRKY89与AtWRKY70高度同源,然而,对于PtWRKY89生物学功能的研究至今尚未报道。可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
选取含有氯嘧磺隆抗性标记的ILV1基因和报告基因GFP二元载体的农AGL-1,采用单因子和双因子方法研究根癌农AGL-1介导柱花草菌CH008转化过程中各主要因素对转化率的影响,优化构建ATMT转化柱花草胶孢菌体系条件,使转化效率达到300~400个转化子/106个孢子,即根癌农AGL-1浓度OD600=0.8,菌分生孢子浓度为1×106个/mL,AS浓度为100 μmol/L,诱导时间为6 h,共培养温度和时间分别为25 ℃和4 d。经PCR检测都有GFP片段,并能够表达绿色荧光蛋白。WRKY转录因子和病程相关蛋白(pathogenesis-relatedproteins,PRs)在植物抗病信号调控途径中起着重要作用。这为进一步开展菌对柱花草的致病机理研究提供了依据,优化转化体系有利于后续突变体库的扩大、筛选突变体和致病功能基因的研究。
(作者: 来源:)