现有的细胞培养基质胶的应用中会碰到哪些问题?
1)Matrigel(基质凝胶)很难处理, 只能在低温条件下溶解, 而且,不同批次间的产品在性能上、上会有不同,即使来自同一个厂家也不可避免;
2)相对来说,建立的微环境并不十分稳定, 较佳培养时间一般不会超过5天,且售价并不便宜;
3)重组层粘连蛋白和纤连蛋白仅适用于某些类型的细胞, 非常不稳定且昂贵;
4)聚
基质胶细胞注射
现有的细胞培养基质胶的应用中会碰到哪些问题?
1)Matrigel(基质凝胶)很难处理, 只能在低温条件下溶解, 而且,不同批次间的产品在性能上、上会有不同,即使来自同一个厂家也不可避免;
2)相对来说,建立的微环境并不十分稳定, 较佳培养时间一般不会超过5天,且售价并不便宜;
3)重组层粘连蛋白和纤连蛋白仅适用于某些类型的细胞, 非常不稳定且昂贵;
4)聚鸟氨酸通常与层粘连蛋白结合使用, 主要限于神经元细胞。
PHENODRIVE 是一类利用合成技术合成的、非动物源性的、模拟细胞外基质的新型细胞、组织培养基质胶(或称基质凝胶), 是传统的基于动物提取的基质胶的较理想的替代品。PHENODRIVE针对不同的细胞系提供了具有不同特性的基质胶, 它可以促进细胞的生长,维持细胞的表型,并将其组织成类似于在活生物体中发现的结构(或称为类、细胞器)。electroris静电纺丝系统主要包括ejector泵、喷丝板、集热系统和高电压电源系统等构成。
问:如何使用PHENODRIVE冻干粉末?
答:在乙醇或任何水介质中溶解, 将基质粉末稀释至0.01mg/mL至0.1mg/mL的浓度,在pH值7.4 的无菌缓冲溶液中, 或在75% 乙醇(用于涂布)中并过滤。
问:如何使用PHENODRIVE对96孔板或24孔板进行涂布?
答:使用移液管将重组液注入各孔(96孔50微升, 24孔200微升)并在无菌条件下通过溶剂蒸发进行实现涂层(建议紫外线照射环境)。蒸发时间将根据基质、浓度和/或体积而变化, 并在干燥后进行清洗。建议无接种细胞, 可在细胞粘附后(如播种后3小时左右)添加。技术参数:1喷丝头,采用横向配置,Thebiggest可连接针数为2,Maximum静电纺丝距离5-17厘米,喷丝板的扫描速度0-30毫米/秒,运动范围(喷丝板的位置)0-30厘米。
利用PHENODRIVE重组溶液对聚合物3D支架进行涂布:
如果采用乙醇溶液进行重组, 应确保所使用的聚合物支架不溶于乙醇 。按照粉末重组步骤, 然后用移液器移取足够的重组溶液将支架完全覆盖, 同样采用自然蒸发的方法在支架的表面及空期间形成一层透明的薄膜。
注:
1、任何的中性的水介质的溶液都可以用来对PHENODRIVE进行重组, 包括缓冲液;
2、采用乙醇的目的是利用其挥发性来缩短溶剂蒸发的时间;
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