病理切片是组织切片的一种,把病变组织做成的切片就叫病理切片。世界上所有的生物都是由细胞构成,人也一样,人生病本质上就是病变组织或器1官构成的细胞发生病变,如果能观察到细胞的变化,就有可能从形态学上判断出疾病,从而进行病理诊断。
有时候医生仅从患者的临床症状体征难以确诊,即便通过辅助检查,比如影像学检查、生化检查,仍然难以判断出疾病,这时候可能需要进行病理诊断,进行确诊。特别是肿1瘤疾病,首先临床医生通过手术把病变组织切除,送到病理科1室,病理医生再进行观察,把病变组成切成3-4μm厚的薄片,将薄片贴附在载玻片上,这种带有病理组织的薄片就是病理切片。病理切片做成以后再放到显微镜上进行观察,从显微镜上观察到细胞改变,就能判断出疾病类型,这就是做病理切片的意义所在。
常见的生物切片,厚度一般在几微米的程度,这种厚度制作起来比较简单,植物石蜡切片技术服务,除了可以使用自动化的设备来切片之外,手动操作也能切到这种厚度,而且完够满足光学显微镜下观察的标准。不过在前沿的科研领域里,需要观察更细微的细胞结构,甚至需要从分子的层面来进行研究,这时候就需要用到电子显微镜。然而电子显微镜也需要更薄的样品,切片至少要达到0.1微米的厚度,而这种切片也就被称为是超薄切片,在很多实验研究里需要厚度达到50纳米,显然手I操作是无法达到这种厚度的。那么在实验环境下是怎样做成这种超薄生物切片的呢首先是需要进行更好的固定,因为在如此薄的尺度之下,不但基本的细胞结构都已经被完全破坏,而且其中的细胞器也都被切开,里面的生物酶会释放出来,并且在很短的时间内使细胞结构遭到破坏。所以就需要在取得样品之后尽快进行固定,要求在一-分钟之 内完成这项操作,然后再使用对应的材料来做透明化以及包埋,接下来还需要配合的切片机来完成切片的过程,从而达到理想的厚度。
在显微镜下观察人体组织,必须将组织切成以微米为单位的薄片,使其透光并易于观察,但直接切取柔软组织是难以办到的。 石蜡包埋法是将“支持物质”-石蜡渗入组织内部,而水与石蜡又是不相混合的,所以在浸蜡和包埋前必须将组织内所含的水分脱去。一般是浸入逐级增加浓度的酒精来完成。
由于酒精和石蜡不能混合,再用或冬青油置换出组织中的酒精,使其透明,然后放入融化的石蜡中。石蜡包埋--将浸蜡的组织块置于包埋框中,冷却后组织块便具有石蜡的硬度,切片机便能将组织切成薄片。切片进行连续切片,厚5μm左右,放入45℃漂烘仪内进行展片。待蜡片展平后进行裱片。将切片放置60C温箱3~5h,使切片粘贴牢固,待用。但是需要注意的是切片时必须保持切片刀锐利,切片要薄而平整、烤片的温度不宜过高,高温烤片对抗原有破坏作用。
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